《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《前列腺癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路激活可增强细胞干性》

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细胞分组同1.2.4节。利用RNA快速提取试剂盒提取各组细胞的总RNA，然后采用PrimeScript RT Reagent Kit将提取获得的RNA反转为cDNA；以此cDNA作为模板，利用SYBR Green Realtime PCR Master Mix试剂以及各待测基因的引物扩增目的基因。PCR扩增条件为95℃预变性30 s；95℃5 s、60℃34 s，共40个循环。以β-actin基因作为内参照，计算出各基因的相对表达量并利用GraphPad Prism 6.0软件进行比较和统计学分析。引物序列见表1。