《表1 实时荧光RPA体系引物与探针序列》

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《副溶血性弧菌实时重组酶聚合酶扩增检测技术研究》


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注:FR-F(1~3)/FR-R(1~3)为RPA正/反向引物;FAM-dT为替代胸腺嘧啶核苷酸的荧光基团;THF为四氢呋喃;BHQ1-dT为替代胸腺嘧啶核苷酸的淬灭基团;C3 Spacer为3'封闭基团。

根据RPA引物设计要求,以副溶血性弧菌tlh基因(GenBank登录号:AY289609)的保守区域为模板,设计一条RPA探针和多套上下游候选引物,固定采用一条下游引物,分别与所有上游引物组合,结合探针FR-P筛选出最佳上游引物,用同样方法筛选出最佳下游引物。见表1。