《表2 R-PE酶解产物的分子质量分布及所占比例》

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如表2所示,由GPC软件分析可知,R-PE在酶解过程中,酶解产物的蛋白分子质量变化是一个渐进的过程。R-PE是由分子质量分别为21、22、32 kDa的3个亚基α、β和γ组成的蛋白质,第1阶段酶解后,65.94%酶解产物的分子质量小于3 kDa;继续酶解,到第2阶段水解完毕,分子质量低于3 kDa的酶解产物的比例增至86.06%,分子质量高于5 kDa的酶解产物的比例由24.30%降至4.52%。R-PE酶解产物的分子质量分布色谱图如图6所示,比较图6a与图6b,经过第1阶段胃蛋白酶酶解的R-PE,在第2阶段经混合酶得到进一步水解,特别是对分子质量大于5 kDa产物的酶解作用效果显著。由此知,经过两步酶解的R-PE几乎被完全水解,表明利用胃蛋白酶、混合酶对R-PE进行分步酶解,可制备出低分子质量、较高活性的R-PE源PEP抑制肽。