《表2 抑制剂对HTS突变体的影响[28]》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《蛋氨酸特异性合成途径关键酶——高丝氨酸O-酰基转移酶的研究进展》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

反馈抑制是蛋氨酸合成过程中基本且快速的调节方式，避免代谢物过量积累影响代谢平衡。E.coli是工业生产的模式菌株，E.coli中HTS受蛋氨酸和S-腺苷蛋氨酸（S-adenosyl methionine，SAM）的协调反馈抑制，1 mmol/L蛋氨酸或1 mmol/L S-腺苷蛋氨酸浓度条件下，HTS活力仅为4%或13%[28]。2005年，Usuda等[28]将E.coli W3110中HTS的R27、I296和P298分别替换为Cys、Ser和Leu，部分解除了蛋氨酸和S-腺苷蛋氨酸的反馈抑制作用，在浓度为100 mmol/L的蛋氨酸或1 mmol/L的S-腺苷蛋氨酸条件下相对酶活力可保持在80%以上，虽然减弱了HTS受到的反馈抑制，但突变后酶活力比野生型HTS更低，仍需进一步研究在保证酶活力的基础上解除反馈抑制（表2）。即便HTS突变后酶活力降低，Usuda等[28]的研究仍为随后改造蛋氨酸合成途径的研究提供参考，Liu Qian等[25]在E.coli中过量表达该解除反馈抑制的HTS（R27C、I296S、P298L）并敲除MetJ和过表达运输蛋白YjeH，使蛋氨酸产量达到1.7 g/L。2015年，段昭炜[36]经定点突变后筛选出抗反馈抑制的突变体（Y299C），在1 mmol/L蛋氨酸或1 mmol/L S-腺苷蛋氨酸存在的情况下酶活力分别为86.3%及79.6%。此后关于该酶反馈抑制解除的研究鲜有报道，但可以看出HTS所受的反馈抑制没有完全解除。相比于解除反馈阻遏来提高酶表达量，通过解除反馈抑制提高酶活力的方法更省时，能耗更少，能更加有效地催化高丝氨酸。因此仍需更进一步对酶的抑制剂结合位点进行研究，提高该酶在抑制剂存在情况下的活力。