《表2 跨膜域删除突变体列表》

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《酿酒酵母GPCR蛋白Ste2亚细胞定位信号探索》

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首先，本实验探究了N端、C端和不同跨膜域的缺失对Ste2在酵母细胞中定位的影响。根据Ste2的结构（图2），本文采用同时删除偶数个相连跨膜域的方式进行初步验证（表2），旨在不破坏蛋白质N、C两端及各环状结构域在膜内外的朝向。在显微镜下观察结果显示:ΔM（1+2）、ΔM（2+3）、ΔM（3+4）突变体无荧光信号；ΔM（4+5）突变体主要呈现疑似内质网（endoplasmic reticulum，ER）的信号（酵母的内质网一部分在核周围，一部分在质膜下）；ΔM（5+6）突变体只剩点状荧光信号；ΔM（6+7）突变体在质膜和液泡以外出现了少量疑似内质网信号；C端缺失出现质膜和疑似内质网的信号，且液泡中信号消失不见；同时删除三个及以上跨膜域时，无荧光信号（结果未展示）。由此推断，M1、M2、M3的缺失可能会造成蛋白质结构出现异常，蛋白质表达出现问题。M4、M5、M6、M7缺失的突变体，出现了其他类型的荧光信号，说明这些跨膜域和相应环状结构域的删除导致蛋白质分选途径部分通路受阻。