《表2 氨基酸虚拟突变后结构稳定的突变体》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《"定向引入N-糖基化位点改进黑曲霉β-1,4-内切木聚糖酶热稳定性"》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

注：Stabilizing表示突变能<-0.5 kcal/mol；Neutral表示-0.5 kcal/mol≤突变能≤0.5 kcal/mol.

（1）利用DS 4.5对xynB模型进行RSA分析，表征暴露在蛋白表面的氨基酸残基（RSA>25%）的分布（图2A）；（2）记录暴露在xynB表面β-转角处和Loop区可构建N-糖基化的氨基酸序列作为可突变序列，共有13条（表1）；（3）xynB模型与底物木五糖的CDOCKER对接结果显示xynB与底物结合时结合面氨基酸有Ser52，Asn80，Tyr108、206、112、123、214，Arg157，Ala161，Trp54、114、173，Val82，Phe81，Gln171和Glu212（图2B）；（4）结合面氨基酸经丙氨酸扫描获得热点残基为Tyr112、206，Trp173，Gln171和Arg157，舍弃含有热点残基的可突变序列；（5）同时舍弃突变后序列Asn-X-Ser/Thr-Y中Y位置为Pro、Glu和Trp的可突变序列；（6）根据N-X-S/T、F-Y-Z-N-X-S/T、F-N-X-S/T、F-X-N-X-S/T序列对候选可突变序列进行氨基酸虚拟突变，保留突变能≤0.5 kcal/mol的突变体。经以上6步筛选得到10个结构稳定的突变体（表2）。