《表4 Loop环和C端双替换突变体列表》

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《酿酒酵母GPCR蛋白Ste2亚细胞定位信号探索》


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前期实验中观察到,C端缺失和替换突变体呈现质膜和内质网信号,液泡中未有可视信号。这一方面说明C端序列包含Ste2进入液泡降解所必需的信号;另一方面,这也为我们提供了一个更易于判读质膜定位程度的工具。利用C端缺失突变体可简化Ste2蛋白在胞内运输去向这一特性,本实验以Ste2蛋白C端替换突变体为基础,进一步替换N端、IL1、IL2、IL3、EL1、EL2、EL3等结构域,构成双替换突变菌株(表4),以此检验哪些氨基酸序列影响Ste2到达质膜(图4)(注:质膜蛋白信号基本连续分布,而质膜下内质网蛋白信号会有明显不连续区域)。