《表2 基因的RT-qPCR引物》

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《桑树中miR319的克隆及在雄花发育中表达分析》

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采用PrimeScriptTM RT Reagent Kit试剂盒（TaKaRa，日本）将物45不同发育阶段雄花芽提取RNA反转录成cDNA作为实时荧光定量PCR（RT-qPCR）反应模板。使用颈环法，检测mi R319a的表达，反转录引物为:5'-GTCGTATCCAGTG CAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACGCACG T-3'。RT-PCR试剂盒为TaKaRa（日本）公司生产的SYBR Premix Ex TaqTMⅡ。以U6为mi RNA内参基因，以Ribosomal protein L15为m RNA内参基因，mi R319、靶基因和内参基因各引物序列组成详见表2。相对表达量计算采用2-△△Ct法[18]。