《表1 转基因‘晚锦橙’编辑效率分析》

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《CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑》

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为了分析转基因植株的编辑效率和突变类型，对获得的所有转基因株系进行T–克隆测序。测序结果表明，17个pCas9CsLOB1:2sites转基因株系中，有11个转基因株系在靶标位点发生了基因编辑，基因编辑效率为64.7%；15个pCas9CsLOB1:3sites转基因株系中有12个在靶标位点发生了基因编辑，基因编辑效率为80.0%。11个发生了基因编辑的pCas9CsLOB1:2sites株系（突变体）所发生的突变或者发生在CsLOB1G链，或者/和CsLOB1-链。突变体C2-12中靶标位点的突变频率为100%，所有的CsLOB1-链发生了相同的突变，而CsLOB1G的突变则含有3种类型，因而C2-12突变体为杂合体（表1，图5）；而剩余的10个突变体中靶标位点的突变频率小于100%，因而这10个突变体为嵌合体（表1）。每个发生了基因编辑的pCas9CsLOB1:3sites突变体（共12个）的突变频率都小于100%，因而所有的pCas9CsLOB1:3sites突变体都是嵌合体（表1）。