《表2 转基因‘晚锦橙’的突变类型分析》

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《CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑》

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注:pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites转基因株系测序的总克隆数分别为680和600。Note:There were 680 and 600 clones in the pCas9CsLOB1:2sites and pCas9CsLOB1:3 sites transgenic lines，respectively.

在突变类型分析中，pCas9CsLOB1:2sites突变体以删除为主，而pCas9CsLOB1:3sites突变体以替换为主（表2）。两种类型的突变体发生的突变大部分是1 bp的插入、删除或替换。pCas9CsLOB1:2sites突变体sg RNA1和sgRNA3之间发生了67、70 bp的删除，删除的效率为5.0%；而pCas9CsLOB1:3 sites突变体sgRNA2和sgRNA3之间发生了37 bp和38 bp的删除，删除的效率为2.3%。pCas9CsLOB1:2sites突变体C2-11和C2-12分别为嵌合体和杂合体，其CsLOB1启动子分别有50.0%和18.0%在sg RNAS1和sg RNAS3位点之间删除。pCas9CsLOB1:3sites突变体C3-1中分别有17.5%CsLOB1启动子在sg RNA2和sgRNA3之间发生了37 bp和38 bp的删除（图5）。上述结果表明，CRISPR/Cas9可以介导CsLOB1启动子上两个sgRNA之间DNA片段的删除。