《表1 艰难梭菌中不同基因编辑方法比较》

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《艰难梭菌基因编辑技术研究进展》

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本文综述了艰难梭菌基因编辑技术的发展历程和最新进展。2002–2004年之间，艰难梭菌限制性内切酶系统得以揭示、克隆了pCD6复制子、实现了外源质粒的结合转移，这些方法的建立、元件的获得，为艰难梭菌基因编辑技术奠定了基础。艰难梭菌基因编辑技术经历了反义RNA、随机转座子、ClosTron技术、ACE技术、CRISPR-Cas技术等不同阶段[10-11，16，19，25，29，30]。实现了从随机基因失活到靶向基因失活、从低效率基因失活到高效基因失活的技术进步（表1）。随着基因编辑技术的发展，艰难梭菌毒力基因在CDI发生过程中的作用[14]、孢子产生机制（spo0A）[12]、肠壁黏附机制（cwp66，cwp2）[10，30，40，75]、抗生素抗性基因功能（tetM，ermB）等得以阐明[30]。由此可见快速、高效、准确的基因编辑技术，在艰难梭菌致病机制、生理、生化特征的研究过程中起到了核心作用，在未来可能进一步影响CDI的防治措施和策略的制定，为更好地预防和控制CDI感染提供理论支持。