《表1 艰难梭菌、人芽囊原虫、隐孢子虫检测引物序列》

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《慢性腹泻患者艰难梭菌、人芽囊原虫和隐孢子虫感染的研究》

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按照粪样基因组DNA提取试剂盒说明书提取DNA。参照文献[15]合成艰难梭菌PCR引物（表1），采用多重PCR检测艰难梭菌16S r RNA基因，毒素A基因（toxin A gene of Clostridium difficile，tcdA）、毒素B基因（toxin B gene of Clostridium difficile，tcdB），二元毒素基因（binary toxin gene of Clostridium difficile，cdtA和cdtB）。反应体系：2×PCR预混液12.5μl，DNA模板2μl，混合引物1.9μl，以水补充体积至25μl。反应条件：94℃10 min；94℃50 s，54℃40 s，72℃50 s，35个循环；72℃3 min。PCR产物通过1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。