《表1 三种新型基因编辑技术的比较》

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《基因编辑技术发展及其在家畜上的应用》

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三种新型基因编辑技术（ZFN，TALEN和CRISPR/Cas）均能实现基因组的定点修饰和编辑，应用范围有很大程度的重合，但是这三种技术在使用方面有不同的技术特点和适用范围（表1）。ZFN技术最先发现，研究应用时间比较长，技术较为完善，但ZFN的识别结构域中存在广泛的上下文依赖效应，在对ZFN的选择方面还有很大的难度，且成本较高，产生较强的细胞毒性，容易引起基因组中其他基因的突变以及染色体畸变（Pattanayak et al.，2011；Radecke et al.，2010）。TALEN技术相比ZFN技术，其识别位点及选择范围变得较宽，而且成本大大降低，打靶效率显著提高和细胞毒性显著降低，但是其限制因素是在识别位点前的第一个碱基必须是胸腺嘧啶，且构建TALEN模块比较复杂，费时费力。最近几年兴起的CRISPR/Cas技术，其打靶效率和适用性要比TALEN和ZFN技术高很多，但是也不可避免的存在一些不足，目前主要存在的问题是PAM序列的依赖性与脱靶效应（Fu et al.，2013；Hsu et al.，2013）。