《表1 prM-E扩增引物》

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《寨卡病毒包膜蛋白重组人腺病毒5型载体的构建与免疫原性测定》

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根据文献[11]报道的日本乙型脑炎病毒（JEV）信号肽氨基酸序列进行核苷酸编码，确定其碱基序列为5’-ATGGGCAAGAGGTCCGCTG-GATCCATTATGTGGTTAGCATCCTTAGCTG-TCGTGATTGCATGTGCAGGCGCA-3’。设计两对引物F1、R1和F2、R2，其中F2序列过长分为F2-1和F2-2进行合成（表1）。RT-PCR获得prM-E片段连接克隆载体pLB/prM-E与穿梭质粒pDC315，同时用EcoRI和BamHI双酶切，酶切得到片段prM-E和载体pDC315连接产物转化DH5α，获得重组穿梭质粒pDC315/prM-E，并测序鉴定，以间接免疫荧光法和Western blot方法检测表达情况。