《表1 提取方法对胞内PHB提取率的影响》

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《聚β-羟基丁酸酯提取方法研究进展》

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溶剂提取法是最传统的PHB提取方法。这种方法研究时间最长，应用比较广泛。溶剂提取法的原理是将PHB溶解在氯仿等氯代烃共沸物、环碳酸酯和四氯呋喃及其衍生物等有机溶剂中，因为非PHB的细胞物质不能溶解，从而达到分离提取的目的[13]。不同的有机溶剂，PHB的提取率不同。薛林贵等[14]研究SDS法、次氯酸钠法、SDS-次氯酸钠法、CHCl3法和CHCl3-CH3OH法对芽孢杆菌胞内PHB提取率的影响，实验结果如表1所示。CHCl3法和CHCl3-CH3OH法属于溶剂提取法，PHB的提取率分别为38.6%和51.3%。采用不同种类的有机溶剂提取PHB，其提取率相差很大。这种方法的优点是操作流程比较简单，操作步骤少，但是也存在一些缺点，如PHB在某些有机溶剂中的溶解度较低，易造成提取困难，提取率偏低；有时需要提高有机试剂的用量，不但生产成本会随之提高，而且也会造成一定程度的环境污染；当培养物黏度过高时，采用有机溶剂分离提取PHB会有一定的困难。通过采用混合培养技术培养菌种，则可以解决这一问题。混合培养技术是指人工建立微生物区系，利用两种或两种以上的微生物不同特性，加以调节控制，从而达到所需目的的技术[15]。将两种或两种以上的菌种混合培养，通过有机溶剂改变细胞膜的通透性，根据PHB和非杂质溶解度的不同，提取PHB[16]，需要注意的是菌体需采用低温冷冻技术进行预处理。这种混合培养技术可以有效改善培养液介质，增加培养物密度，提高PHB质量和降低PHB生产成本。