《表1 实验中所使用的引物》
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《枯草芽胞杆菌8-32对病原真菌的拮抗效应及对植物促生长机制》
sboA:枯草杆菌素A合成酶基因;yndj:假定蛋白合成基因;FenB:丰原素合成酶基因;qk:枯草杆菌蛋白酶基因;srfAB:表面活性素合成酶基因;bamC:杆菌抗菌素合成酶基因;ituC:伊枯草菌素合成酶基因;下同
根据已报道相关拮抗基因的引物(表1)(Yun et al.,2012) ,对菌株8-32中拮抗基因进行PCR扩增,反应体系(20μL):10×buffer(缓冲液)2.0μL,2.5mmol/L dNTPs各1.6μL,Taq酶(5 U/μL)0.2μL,DNA模板1.0μL,ddH2O 13.2μL,10μmol/L上、下游引物各1μL。PCR扩增程序为:94℃预热5 min;94℃变性30 s,不同基因对应不同的退火温度,枯草杆菌素A合成酶基因(subtilosin A,sboA)对应的退火温度为52℃,假定蛋白合成基因(hypothetical protein yndj gene,yndj)、丰原素合成酶基因(fengycin gene,fenB)、枯草杆菌蛋白酶基因(subtilisin gene,qk)、表面活性素合成酶基因(surfactin gene,srfAB)、伊枯草菌素合成酶基因(iturin gene,ituC)和杆菌抗菌素合成酶基因(bacillomycin gene,bamC)的退火温度为56℃;退火时间为30 s,72℃延伸1min,30个循环;72℃延伸10 min,4℃保存备用。1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,对单一条带进行测序。
图表编号 | XD0055619500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.05.25 |
作者 | 王欢、贾田惠、杨可欣、时向哲、高同国、朱宝成 |
绘制单位 | 河北农业大学生命科学学院、河北农业大学生命科学学院、河北农业大学生命科学学院、河北农业大学生命科学学院、河北农业大学生命科学学院、河北农业大学生命科学学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |