《表1 实验中所使用的引物》

《表1 实验中所使用的引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《枯草芽胞杆菌8-32对病原真菌的拮抗效应及对植物促生长机制》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录
sboA:枯草杆菌素A合成酶基因;yndj:假定蛋白合成基因;FenB:丰原素合成酶基因;qk:枯草杆菌蛋白酶基因;srfAB:表面活性素合成酶基因;bamC:杆菌抗菌素合成酶基因;ituC:伊枯草菌素合成酶基因;下同

根据已报道相关拮抗基因的引物(表1)(Yun et al.,2012) ,对菌株8-32中拮抗基因进行PCR扩增,反应体系(20μL):10×buffer(缓冲液)2.0μL,2.5mmol/L dNTPs各1.6μL,Taq酶(5 U/μL)0.2μL,DNA模板1.0μL,ddH2O 13.2μL,10μmol/L上、下游引物各1μL。PCR扩增程序为:94℃预热5 min;94℃变性30 s,不同基因对应不同的退火温度,枯草杆菌素A合成酶基因(subtilosin A,sboA)对应的退火温度为52℃,假定蛋白合成基因(hypothetical protein yndj gene,yndj)、丰原素合成酶基因(fengycin gene,fenB)、枯草杆菌蛋白酶基因(subtilisin gene,qk)、表面活性素合成酶基因(surfactin gene,srfAB)、伊枯草菌素合成酶基因(iturin gene,ituC)和杆菌抗菌素合成酶基因(bacillomycin gene,bamC)的退火温度为56℃;退火时间为30 s,72℃延伸1min,30个循环;72℃延伸10 min,4℃保存备用。1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,对单一条带进行测序。