《表1 引物序列：利用基因沉默技术验证东方百合‘Justina’番茄红素β-环化酶基因的功能》

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《利用基因沉默技术验证东方百合‘Justina’番茄红素β-环化酶基因的功能》

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本实验室前期通过百合转录组文库分析得到LoLcyB基因CDS序列[15]，采用Primer 5.0设计引物，在引物前端加入EcoR I和BamH I的酶切位点和保护碱基，定量验证TRV1和TRV2载体所需引物并根据TRV载体序列设计[16]，由北京六合华大基因科技有限公司合成（酶切位点和保护碱基用下划线表示，见表1）。依照试验设计构建pTRV2-LoLcyB重组载体，重组载体pTRV2-LoLcyB的示意图见图1。采用T4DNA Ligase Buffer对目的片段和目标载体进行连接，转入Escherichia coli DH5α培养，选取阳性克隆菌液进行测序验证，并提取pTRV2-LoLcyB重组质粒，进行PCR扩增验证。