《表2 基因引物序列：沉默赖氨酰氧化酶改善食管癌术后吻合口狭窄》

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《沉默赖氨酰氧化酶改善食管癌术后吻合口狭窄》

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应用Trizol裂解液（美国Invitrogen）提取细胞的总RNA，用Nanodrop2000测量RNA浓度，将1μg的RNA经逆转录试剂盒（北京全世金公司）转录成cDNA用于下一步的real‐time PCR检测。PCR反应体系为10μL:5μL Fast SYBR Green Master Mix（美国ABI公司），3μL灭菌去离子水，1μL cDNA模板和0.5μL的引物。LOX、基质金属蛋白酶2（matrix metalloprotein‐ase 2，MMP2）、基质金属蛋白酶9（matrix metallo‐proteinase 9，MMP9）、纤维粘连蛋白（fibronectin，FN）和β‐actin引物见表2。PCR反应条件为:95℃20 s后，95℃3 s和60℃30 s经历40个循环。目的基因mRNA的表达采用相对定量的方法:相对表达量=2-△Ct，△Ct=（目的基因Ct值-β‐actin的Ct值）。