《表1 siRNA-LOX的序列和作用靶点》

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《沉默赖氨酰氧化酶改善食管癌术后吻合口狭窄》

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根据人LOX基因序列，选择3个靶点设计3对siRNA‐LOX序列及1对无义对照序列；siRNA‐LOX由广州锐博有限公司合成，分别为siRNA‐LOX1，siRNA‐LOX2，siRNA‐LOX3（表1）和阴性对照（Negative control，NC）。转染前1 d原代食管癌成纤维细胞用胰酶消化并传入6孔板，第2天观察细胞密度为50%时，分别转染NC，siRNA‐LOX1，siRNA‐LOX2，siRNA‐LOX3，转染浓度为每孔100 nmol/L，转染试剂盒采用脂质体Lipofectamine 2000并按试剂操作说明书进行转染。转染完成后6 h细胞换液并于37℃、5%CO2的培养箱中培养48～72 h后进行检测分析。