《表1 RT-qPCR反应中使用的基因》

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《层出镰刀菌处理对食用百合保护酶相关基因表达的影响》

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实时荧光定量PCR（RT-qPCR）采用20μL反应的总体系，按照TB GreenTMPremix Ex TaqⅡ（Tli RNaseH Plus）试剂盒进行操作。各反应成分的含量为TB Green Premix Ex TaqⅡ（Tli RNaseH Plus）（2×） 10.0μL，ROX Reference Dye（50×）0.4μL，正向和反向引物各0.8μL，cDNA模板1μL，加水至20μL，混匀，离心，放入ABI StepOnePlus实时荧光定量PCR仪扩增。RT-qPCR反应条件为:预变性95℃，1min；变性95℃，30s；退火60℃，30s；延伸72℃，30s，35个循环，每个样本/基因重复3次，溶解曲线用于判断扩增产物的特异性。RT-qPCR的引物是根据NCBI发布的相关基因mRNA完整序列用Primer 7.0设计，由上海生工合成（表1）。