《表1 qRT-PCR引物序列》

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《来曲唑通过cAMP通路下调MMP-2的表达抑制子宫肌瘤细胞的迁移与侵袭》


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细胞总RNA按照RNA提取试剂盒提取总RNA。设计MMP-2、c AMP、Bcl-2、P450arom、Bax、caspase-3、TIMP-2引物,交由Ta KaRa公司合成(表1)。应用ABI7500定量PCR仪进行实时荧光定量PCR检测,反应条件为95℃预变性10 min,95℃变性30 s,60℃退火20 s,72℃延伸34 s,40个循环。荧光定量PCR反应体系20μl:SYBRPremix Ex TaqTMⅡ(2×)10μl,PCR Forward Primer(10μl)0.8μl,Uni-miR q PCR Primer(10μl)0.8μl,ROX Reference Dye(50×)0.4μl,逆转录获得cDNA模板2μl,ddH2O 6μl。目的基因的表达水平采用2-ΔΔCt法计算。