《表2 Apo B、β-actin特异性引物序列》

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《乙型肝炎病毒与载脂蛋白B关系及其意义的实验研究》

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三组受试者空腹12～14 h后采静脉血5 ml，加入肝素抗凝，1 000/min离心5 min，血浆置-80℃保存，逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和琼脂糖凝胶电泳法检测血浆Apo B含量[2]。培养HepG2（肝癌细胞系）细胞，对一部分细胞进行细胞转染，加入pHBV1.3质粒，未转染过的细胞标为HepG2.1，转染过的细胞标为HepG2.2，将细胞放置于加入了转染液的细胞培养基中，在CO2培养箱中继续培养。然后进行RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳法检测:对转染和未转染的两种细胞用TRIzolR试剂提取细胞总RNA，经DNA酶处理后取1μg用反转录酶合成cDNA，然后对ApoB基因的RT-PCR检测引物进行检测，同时以β-actin作为内参照进行平行扩增（ApoB、β-actin特异性引物序列见表2），采用软件Primer Premier5.0进行引物设计，扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳进行检测[2]。对转染与未转染pH-BV1.3质粒HepG2细胞中AopB mRNA的表达进行比较，以观察HBV对AopB表达的影响。