《表1 β-actin、TNF-α、IL-1β引物序列》

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《山慈菇正丁醇提取物对NR8383细胞分泌的IL-1β和TNF-α水平的影响》

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将NR8383细胞按照1×106/m L接种于6孔板上，用Trizol试剂盒提取NR8383的RNA，用PrimeScriptRT Master Mix反转录得cDNA，配置成10μL体系:500ng总RNA、2μL MIX（dT），加无酶水至10μL。配置PCR反应体系，配置成25μL反应体系:上游引物1μL，下游引物1μL，模板2μL，12.5μL SYBRPrime Ex Taq TWⅡ，加去离子水至25μL。IL-1β和TNF-α:95℃30 s预变性，95℃30 s变性，60℃，40 s退火，40次循环；每个样品重复6次；计算IL-1β和TNF-α基因的相对表达量，公式为2-（ΔCt）。其中β-actin、TNF-α、IL-1β与上下游引物序列如表1所示。