《表1 IL-1β、IL-6、TNF-α和GAPDH基因引物序列》

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《片仔癀通过抑制TLR4/MAPK信号通路减轻LPS诱导的BV2小胶质细胞神经炎症损伤研究》

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将BV2小胶质细胞接种于6孔板，种板密度为1.6×105个/m L，每孔2 m L，设置3个复孔，置于37℃、5%CO2饱和湿度培养箱培育12 h后更换新培养基，按照组别加入对应的PZH和LPS，置于培养箱中继续培养12 h后弃上清，用预冷的PBS洗涤3遍后加入TRIzol提取总RNA，使用逆转录试剂盒制备c DNA，然后以该c DNA为模板，使用扩增试剂盒进行扩增。采用引物设计软件Primer 5设计促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及内参GAPDH的引物序列。PCR扩增反应条件为：95℃预变性30 s，95℃变性10 s，退火60℃30 s，40个循环。相应引物序列见表1。