《表5 检测Neo基因用的引物》

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《CRISPR/Cas9介导获得用于分离双峰驼iPSCs的转染细胞系》

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提取药筛后的F5代细胞，进行总RNA提取，按照反转录试剂盒说明书进行操作，反转录出第1条c DNA链。用设计好的Neo基因检测引物（表5）进行扩增，扩增时72℃延伸时间为30 s，其余条件同1.2.1.1。提取总DNA，扩增基因组中eGFP-Neo基因片段，引物为表1中的P2A-GFP-F与PGK-R；并用表4中的两对引物对敲入标记基因的基因的片段进行扩增，扩增时72℃延伸时间为1.5 min，其余条件同1.2.1.1。