《表1 研究中使用的引物:Q61R和V112A突变的HRAS基因在NIH小鼠体内诱发肿瘤的实验研究》

《表1 研究中使用的引物:Q61R和V112A突变的HRAS基因在NIH小鼠体内诱发肿瘤的实验研究》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《Q61R和V112A突变的HRAS基因在NIH小鼠体内诱发肿瘤的实验研究》


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1:RM代表PCR点突变用引物,G12C、G13C、G12C/C13C、Q16R代表突变氨基酸的位置和类型,F和R分别代表正向引物和反向引物;2:下划线核苷酸代表设计的Nhe I和Hind III酶切位点,字体加粗的ATG和CTA分别代表HRAS mRNA的起始密码子和终止密码子,引物序列中小写加粗部分代表突变的密

人结肠癌DiFi细胞和L929小鼠成纤维瘤细胞由中国食品药品检定研究院细胞室提供;SPF级NIH小鼠由中国食品药品检定研究院试验动物繁育中心提供;HRAS基因由DiFi细胞中扩增,经测序,其含有V112A突变,将其命名为HRAS(V112A);pCDNA3.1(+)质粒由本室保存;鼠抗人HRAS抗体和鼠抗GAPDH抗体购自中杉金桥公司;引物(表1)由上海生物工程技术有限公司合成;Trizol、Lipofectamine 2000和逆转录试剂盒(Superscript First-Strand Synthesis System)购自Invitrogen公司;pMD-18-T载体、2×Primer Start Premix购自Takara公司;质粒大提试剂盒购自Gibco公司。