《表1 不同分组的酶液组成》
| 图表编号 | B1666254666 |
|---|---|
| 出版时间 | 2019.12.30 图表说明 ➫ |
| 作者 | 杜小云、王震、王翠华、曾弓箭、沈祥陵 |
| 研究主题 | “红颜”草莓原生质体制备及瞬时转化体系的建立 |
| 出版单位 | 三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室、三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室、三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室、三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室、三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室 |
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“红颜”草莓原生质体制备及瞬时转化体系的建立中，取继代培养后的“红颜”草莓幼嫩叶片0.02 g，70%酒精消毒40 s，无菌水冲洗3遍，再用0.5%次氯酸钠溶液浸泡7 min，无菌水冲洗5遍，最后用无菌纱布吸收掉叶片上的多余水分。将叶片剪切成3 mm×5 mm大小后放入9 mol/L甘露醇溶液中预处理2 h。本试验采用酶解法在设定条件下对“红颜”草莓嫩叶进行原生质体的分离制备，酶液组成如表1所示。酶液使用0.1%的MES和0.5%的PVP溶解于CPW溶液配制而成，最终调节pH值为5.6。使用0.2μm滤膜过滤除菌后放入至50℃水浴锅中预热10 min，按照酶液与材料10∶1～20∶1的比例加入到已剪切好的叶片中。黑暗环境，在不同温度（28、29、30、31和32℃）条件下，分别以30、40、50、60和70 r/min不同震摇转速及静置方式下进行酶解反应。
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