《表1 17个Ah COL基因克隆引物表》

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《花生CONSTANS-Like(COL)家族基因的克隆与表达分析》


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本研究试验材料为航花2号,采用盆栽的方式种植。植株开花前,取300 mg叶片经液氮研磨,加入1 m L Invitrogene TRIZOL试剂静置;加入300μL氯仿,13 000 g离心5 min,取上清液450μL并加入500μL预冷的异丙醇,13 000 g离心5 min,70%无水乙醇洗涤两次,DEPC水溶解获得叶片的总RNA。取1μg总RNA,利用TOYOBO的反转录试剂盒FSK-100获得全长c DNA,以此作为模版,利用KOD Neo Plus PCR聚合酶与特异性引物(表1)克隆AhCOL基因,琼脂糖凝胶电泳检测。