《表1 耐药基因的引物序列》

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《狐源大肠杆菌中氯霉素类抗生素耐药基因的检测》

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PCR扩增的模板为已鉴定的大肠杆菌的质粒和菌液，采用25μL PCR扩增体系，按照参考文献[8-9]设计引物序列（表1）。PCR扩增体系为94℃预变性5 min；94℃变性1 min，退火1 min，72℃延伸1 min，共30个循环；72℃延伸5 min，退火温度见表1。对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳验证，随机选择各个基因的阳性样本进行胶回收，连接到18-T载体上，进行克隆测序后将质粒样本送至吉林库美生物技术有限公司，利用DNASTAR软件分析，与NCBI的数据库进行同源性比较分析。