《表4 耐药基因的引物序列》

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《白念珠菌ERG3基因敲除及其对耐药性的影响》

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按照酵母总RNA提取试剂盒说明书提取SN152、ERG3+/-和ERG3-/-菌株的总RNA。根据反转录试剂盒对抽提的总RNA进行去基因组和反转录反应，获得cDNA。使用SYBR Premix Ex Taq酶试剂盒对3株菌株的cDNA行实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR，qPCR）检测，反应条件为：95℃30 s；95℃5 s，60℃1 min(40个循环）。溶解曲线反应为：95℃15 s、60℃1 min、95℃15 s。引物序列见表4。每个菌株均做复孔，重复3次，以18S RNA为内参基因，应用ABI 7300 SDS软件系统进行检测，CT值通过2-△△CT法进行相对基因表达分析。