《表1 耐药基因引物序列信息》

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《密云区致泻大肠埃希菌耐药性及耐药基因研究》


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注:F代表上游引物,R代表下游引物。

通过PCR的方法对β-内酰胺类bla TEM、bla SHV、bla OXA,氨基糖苷类aac(3′)-IIa、aad A1、aad B,四环素类tet A、tet B、tet C,氯霉素类flo R、磺胺类SUL1、SUL2,喹诺酮类Gyr A、Gyr B、Par C等15种耐药基因进行检测。采取25μL反应体系,上、下游引物各1μL,2×Taq Master Mix12.5μL,模板1μL,水9.5μL。各引物PCR反应条件耐药基因扩增的引物序列及温度体系等详见参考文献[6?10],如表1。反应条件为变性95℃30 s,退火温度30 s,延伸72℃45 s,共30个循环,最后延伸72℃,10 min。