《表1 牛ACSL1基因si RNA的靶向序列》

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《siRNA沉默ACSL1基因对秦川肉牛脂肪细胞中不饱和脂肪酸合成的影响》

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ACSL1：长链脂酰辅酶A合成酶1；下同

根据牛ACSL1基因（Gen Bank No.537161）全序列，由广州锐博生物公司合成3对si RNA序列，如表1所示。准备生长状态良好并且融合度为70%～90%的P2代牛脂肪细胞，用Opti培养基分别稀释转染试剂Lipofectamine?3000和si RNA，充分混匀后静置5 min；将两种稀释液等体积混合，室温静置10 min，将250μL混合液逐滴加入6孔板中，培养12～24 h后弃去培养基，换成含10%FBS的完全培养基，培养12～24 h后收集细胞检测转染效率，每个处理设置3个重复。