《表1 Ta APX基因克隆及q PCR引物序列》

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《杂交小麦抗坏血酸过氧化物酶基因克隆及其在种子老化中的潜在功能分析》

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以拟南芥APX3蛋白序列（Gen Bank登录号为AT4G350001）为探针，对小麦蛋白数据库进行本地BLAST，获得小麦APX基因（ID:100125717）。提取小麦APX的CDS序列，利用Primer 5.0软件设计CDS全长克隆引物，由金维智（北京）合成（表1）。以BS1453/11GF5135种子的c DNA为模板进行PCR扩增，PCR扩增体系20μL:2×Easy Taq Super Mix10μL，上下游引物（10μmol L–1）各1μL，c DNA模板2μL，dd H2O 6μL，扩增程序:94℃5 min；94℃30 s，71℃45 s，72℃1 min，42个循环；72℃10 min。对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，回收目的条带，连接到16318h GFP载体上，连接产物转入DH5α感受态细胞，经菌落PCR验证后，各挑选7个阳性克隆子进行测序，测序和引物合成均由金维智（北京）公司完成。