《表1 Lmdesats研究中使用的引物》

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《飞蝗脂肪酸去饱和酶家族基因表达及功能分析》

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摘取发育整齐的五龄第6天飞蝗若虫不同组织部位，包括体壁（IN）、前肠（FG）、中肠（MG）、后肠（HG）、胃盲囊（GC）、马氏管（MT）、生殖腺（GD）、脂肪体（FB）和翅芽（WP），以及5龄每天（1-8天）翅芽或胃盲囊。利用RNA提取试剂提取不同组织和时期样品总RNA并进行定量（样品稀释成0.5μg/μL），取1μg总RNA按照反转录试剂盒说明书进行c DNA的合成并进行10倍稀释。利用Primer5.0软件设计Lmdesats基因和RPL32内参基因的特异性表达引物（见表1，生工公司合成），利用荧光定量PCR方法检测Lmdesats基因在不同组织和不同发育时期中的表达特性，荧光定量PCR反应体系及反应条件参考课题组方法进行[7]。每个不同组织部位或发育日龄均由3头试虫组成一个重复，共计4个重复。以RPL32作为内参基因，Lmdesats基因在不同组织部位或发育日龄的相对表达量采用2-ΔΔCt法进行分析。