《表2 耐药基因PCR引物序列[3,10]》

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《武汉地区食源性沙门氏菌耐药特征分析》


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用Takara公司生产的试剂盒提取上述菌株的总DNA,作为耐药基因PCR检测模板。参考文献设计合成耐药基因PCR引物,如表2用于扩增β内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、磺胺类等10种耐药基因[3,9,12]。PCR反应体系(25μL):1.1×PCR premix 22μL,上下游引物(10μmo L/m L)各1.0μL,模板DNA 1.0μL。PCR扩增条件为:95℃5min;95℃30 s,55~56℃30 s,72℃30 s,35个循环,72℃10 min。PCR结束后,将PCR样品与DNA maker一同置于全自动核酸分析仪中跑胶分析,记录实验结果。ATCC14028作为PCR质控菌株,无菌水作为DNA模板为阴性对照。