《表1 白纹伊蚊VGSC基因片段扩增引物》

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《舟山市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性表型和KDR基因突变分析》


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随机选取10只敏感品系和27只自然品系表型为敏感的白纹伊蚊,选择所有表型为抗性的白纹伊蚊(共3只),单管单只存放,送生工生物工程(上海)股份有限公司提取基因并测序。按照PCR试剂盒说明书提取单只蚊虫基因组DNA。根据白纹伊蚊的电压门控钠离子通道VGSC (No.AY663384)基因部分序列,参照文献[7-8]合成3对引物组(表1),通过PCR扩增结构域Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的部分DNA片段,其中aeg SCF20和aeg SCR21用于扩增结构域Ⅱ,aeg SCF7和aeg SCR7用于扩增结构域Ⅲ,alb SCF6和alb SCR8用于扩增结构域Ⅳ。测序引物采用四色荧光标记的双脱氧末端终止法,包括aeg SCF3(结构域Ⅱ的正向引物)、aeg SCR22(结构域Ⅱ的反向引物)、aeg SCR8(结构域Ⅲ的反向引物)和alb SCF7(结构域Ⅳ的正向引物),见表2。