《表1 PCR引物序列信息》

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《长白猪PPARα、PPARγ基因的克隆、表达及生物信息学分析》


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以12种组织的cDNA为模板,使用定量PCR引物序列(表1),参照TAKARASYBR?Premix Ex TaqTM II试剂盒进行荧光定量PCR检测基因在各组织中的表达量。PCR反应体系20μL:SYBRqPCR Mix 10μL,cDNA 2μL,上、下游引物(10 pmol/L)各0.4μL,ROX Reference Dye2 0.4μL,去离子水6.8μL。PCR反应条件:预变性95℃5 min;循环反应,95℃10 s,60℃30 s,共40个循环。采用GAPDH为内参校正个体间差异,利用2-△△Ct方法计算长白猪PPARα和PPARγ在各组织中的相对表达量,并使用GraphPad Prism5软件[19]将表达量进行单因素方差分析。