《表2 Lnc RNA-AC和SND1的q PCR引物序列》

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《长链非编码RNA(AC073934.6)慢病毒质粒构建及其对HEY和HeLa细胞系SND1表达的影响》

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待HEY、He La细胞的融合率达到60%，加入9 m L病毒液，1 m L胎牛血清和75μg polybrene。感染48 h后更换新培养基并加入1μg/m L嘌呤霉素进行筛选，阳性细胞即为稳定株。取1×106稳定株细胞，用TRIzol法提取总RNA，分别取3μg逆转录为c DNA，用PCR法检测lnc RNA-AC的表达，实时荧光定量PCR检测SND1的m RNA水平，引物如下（表2）。同时用10 cm皿培养细胞，随后提取总蛋白检测蛋白浓度，经8%SDS-PAGE，检测感染lnc RNA-AC之后SND1蛋白水平变化情况。