《表2 Ets基因定量引物》

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《魁蚶Ets家族9个基因的克隆及其在病毒感染应答中的表达分析》

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按照Trizol法提取血细胞总RNA，对提取的总RNA进行质量和浓度检测后，以总RNA为模板，用反转录试剂盒（Prime ScriptTM cDNA Synthesis Kit，TaKaRa）合成模板，操作方法按照说明书进行。以魁蚶RL15作为内参基因（Xin et al，2018），使用Primer 5.0设计Ets定量引物（表2），对Ets进行qPCR检测。检测使用Universal qPCR Master Mix试剂盒（NEB），反应体系（20μl）:SYBR?Premix Ex TaqⅡ10μl、前引物1μl、后引物1μl、模板2μl、超纯水6μl；反应程序：95℃5 min；95℃15 s，60℃20 s，72℃20 s，40个循环。每组实验均实验重复3次。2?ΔΔCt方法对荧光定量PCR检测结果进行分析，利用SPSS 20.0对结果进行显著性分析。