《表1 实验教学(留学生)项目》

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《研究生层次留学生生物化学与分子生物学实验教学的探索》


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实验项目中从第3项开始是围绕小麦转录因子基因Ta WRKY71的克隆与表达载体的构建设计的。下面将有选择性地就实验项目进行具体说明。(1)真核基因组DNA的提取与检测:学习基因组DNA提取原理,进行小麦DNA提取实验;提取后采用紫外分光光度计进行检测。(2)以小麦Ta WRKY71基因的结构特征与生物学功能为理论基础,采用PCR仪进行Ta WRKY71基因的扩增实验。实验中,以PCR引物设计与合成、PCR反应体系组成、PCR产物检测方法为主导进行实验。(3)DNA的琼脂糖凝胶电泳与定量:电泳检测对Ta WRKY71基因的扩增效果,回收目标片段。(4)细菌质粒DNA的提取技术:介绍质粒DNA在基因工程中的应用,从大肠杆菌DH5α菌液中提取质粒p KIGW。(5)Gateway克隆技术与应用:以常用的酶切连接原理与Gateway克隆技术的比较为理论基础,进行表达载体与目的基因的连接。(6) DNA的酶切与检测:利用生物学软件分析酶切产物的片段大小为依据,通过酶切与电泳检测新构建的植物表达载体p KIGW-Ta WRKY71的准确性。