《表1 qPCR引物及循环条件》

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《围垦对滨海稻田土壤N_2O还原潜力的影响》


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实时PCR扩增所用仪器为CFX96 Real-Time PCR System(Bio-Rad公司)。标准曲线分别用含16S rRNA、nos ZⅠ和nos ZⅡ基因的质粒为模板,并将其连续稀释8个数量级配制。定量PCR扩增反应体系为20μL,包括:10μL的SYBR Premix EX TaqTM,1.0μL土壤总DNA模板,上、下游引物(10 pmol·μL-1)各0.5μL,加灭菌水至20μL。16S rRNA基因和nos Z基因PCR引物及qPCR的循环条件见表1。所有样品重复3次,并采用灭菌双蒸水代替DNA作为反应模板设置阴性对照。