《表1 qRT-PCR引物序列》

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《结核分枝杆菌对miR-21和TLR-4/NF-κB信号通路的影响研究》

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利用Trizol法提取总RNA，检测合格后，利用逆转录试剂盒逆转录，获得cDNA，利用qRT-PCR试剂盒检测miR-21、TLR4、NF-κB mRNA表达。反应体系为20μL:2×SYBR Green Mix 10μL，正向引物1μL，反向引物1μL，cDNA 1μL，ddH2O 7μL。反应条件如下：95℃30s，95℃5s，60℃30s，72℃30s，40个循环，循环结束后升温至95℃15s，降至60℃15s，95℃20min。每个标本均重复检测3次，结果取平均值，相对表达水平根据2-ΔΔCT法计算，见表1。