《表1 突变体水解Vx的动力学常数》

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《磷酸三酯酶对Vx的洗消研究进展》

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注：a单位为L·mol-1·min-1。

Andrew N.Bigley等[3]通过两点突变方法得到的PTE突变体QF（H254Q/H257F）对Vx的水解效率提高了近100倍。他们在此基础上继续进行定点突变和重叠延伸PCR，新突变体CVQFL（VQFL+I106C）的Kcat/Km值为2.2×104L·mol-1·s-1。通过对CVQFL loop-7（253-276氨基酸残基）进行易错PCR扩增建库，筛选获得的突变体L7ep-3水解Vx的Kcat/Km值为6×104；而突变体L7ep-3a的Kcat值达到了137 s-1。该团队在最近研究中，通过活性位点定点突变的方法产生了多种新突变体，其中BHR-4、BHR-69、BHR-23对Vx的水解活性明显得到提高，Kcat/Km值最高达到7.7×105L·mol-1·s-1[21]。上述突变体水解Vx的动力学常数如表1所示。