《表1 Pvmsp-1、Pvcsp基因PCR扩增引物》

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《间日疟原虫裂殖子表面蛋白1和环子孢子蛋白基因多态性分析》

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采用全血DNA抽提试剂盒提取患者血样疟原虫基因组DNA，参照文献[13-14]的方法分别设计Pvmsp-1、Pvcsp基因特异性引物（表1）。巢式PCR分别扩增Pvmsp-1 ICB5-ICB6和Pvcsp基因中央重复区及前后特异性基因片段，扩增Pvmsp-1基因第一轮反应体系为：PCR反应混合物10μl，引物Pvmsp-1-F1/Pvmsp-1-R1(10μmol/L）各1μl，模板2μl，纯水6μl；第二轮反应体系为：PCR反应混合物25μl，引物Pvmsp-1-F2/Pvmsp-1-R2(10μmol/L）各2μl，模板2μl，纯水19μl。第一轮和第二轮反应条件一致，均为94℃5 min；94℃1 min，55℃1 min，72℃1 min，30个循环；72℃10 min。