《表1 qRT-PCR引物》

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《miRNA-192调控NOD2在结核分枝杆菌感染中的作用研究》

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采集受检者防凝全血2ml，按照1∶3的比例加入红细胞裂解液，得到的白细胞按照TRIzol法的步骤提取总RNA，使用核酸定量仪测定RNA含量（>80ng/μl）和纯度（A260/A280值为1.8～2.0）。对于NOD2mRNA的扩增选定内参为GAPDH，按照试剂说明书进行逆转录合成cDNA。逆转录条件：37℃15min，85℃5s，4℃保存。取cDNA 2μl，上、下游引物各1μl，TB Green Premix Ex Taq 12.5μl，DEPC处理水8.5μl，组成25μl反应体系。对于miRNA-192选定的内参为U6。逆转录条件：37℃1.5h，85℃5min。取cDNA 2μl，上、下游通用引物各0.5μl，SYBR Advantage Premix 12.5μl，ROX Dye 0.5μl，以及DEPC处理水9μl共同组成25μl的反应体系。引物序列见表1。定量测定循环阈（eycle threshold，Ct）值。对所得Ct值采用比较循环阈值法（2-△△t）进行分析。