《表1 qRT-PCR引物序列》

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《层粘连蛋白对牛骨骼肌卫星细胞增殖分化的影响》

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于培养箱中取出24孔板，用预热的无酶PBS清洗细胞2次，加入600μL RNA细胞裂解液充分裂解细胞，利用细胞RNA高效提取试剂盒提取RNA，后采用PrimeScriptTM II 1st Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒对mRNA进行反转录，再采用实时荧光定量PCR技术检测细胞培养各时期中实验组（涂有LN）和对照组（涂有PBS）增殖期标志基因Pax7及成肌分化标志基因MyHC的表达情况。qRT-PCR反应体系：上、下游引物各0.5μL（0.25μmol/L），Mix 10μL，cDNA分别为2μL，RNase free water补至20μL。反应条件：95℃10 min、95℃10 s、60℃20 s、72℃15 s，重复35个循环。qRT-PCR反应引物序列见表1。