《表1 Q热病原引物和探针信息》

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《我国北方地区部分规模奶牛场Q热流行情况初步调查》


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采用《OIE陆生动物诊断与疫苗手册》3.1.16章推荐的荧光定量PCR方法[3]。针对Q热病原IS1111特异性靶基因设计引物和探针(表1),按照试剂盒说明书进行核酸扩增。荧光定量PCR反应体系和反应程序为:2×One Step RT-PCR Buffer 12.5μL、上游引物0.5μL、下游引物0.5μL、探针0.25μL、ddH2O 8.25μL;50℃2 min,95℃10 min;95℃10 s,60℃1 min,循环45次。任意一孔阴性对照出现阳性结果或任意一孔阳性对照出现阴性结果,提示本次荧光定量PCR检测无效,应重新开展检测;Ct值小于38,判为阳性,大于38,判为阴性。