《表3 实验用引物和探针信息》

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《Chelex 100树脂快速提取动物组织基因组DNA方法的评估》

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应用qPCR方法检测巴尔通体的扩增反应体系为20μl，Taq DNA聚合酶和dNTP混合液（HR qPCR Master Mix）10μl，探针0.4μl（终浓度200 nmol/L），上、下游引物各0.8μl（终浓度400 nmol/L），去离子水5μl，样品DNA模板3μl，做3个平行孔。阳性对照模板为质粒标准品1μl。扩增反应参数:第1步，95℃变性5 min；第2步，95℃变性15 s，60℃退火45 s，40个循环。应用常规PCR方法扩增COⅠ基因片段的反应体系为25μl，2×TransTaq-T PCR Super Mix加12.5μl，上、下游引物各加1μl（10μmol/L），样品DNA模板加1μl，去离子水补齐。扩增反应参数:第1步，95℃变性30 s；第2步，95℃变性30 s，54℃退火30 s，72℃延伸1 min，35个循环；第3步，72℃延伸3 min。上述扩增使用去离子水作为空白对照反应的模板。