《表1 柯里拉京合成相关基因qPCR引物序列》

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《苯丙氨酸和茉莉酸甲酯对龙眼胚性悬浮细胞柯里拉京积累的影响》

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利用DNAMAN 6.0软件进行引物设计（表1），引物由上海尚亚生物技术有限公司合成.采用TriPure（Roche）试剂盒进行龙眼悬浮细胞总RNA提取，RNA浓度和纯度经超微量分光光度计检验合格后，采用PrimerscriptTM RT Reagent Kit(TaKaRa）将其逆转录合成cDNA用于qPCR分析.参考Lin的方法[33]并适当改良，以UBQ、EF-1a和ACTB作为内参基因，将不同浓度处理的样品cDNA模板混样进行5倍梯度系列稀释制作标曲，通过Roche LightCycler480荧光定量PCR仪检测柯里拉京合成相关基因DlDFR、DlANR、DlLAR的表达情况.qPCR反应体系（20μL）:SYBR 10μL，上下游引物各0.8μL，cDNA 1μL（稀释10倍），加ddH2O补足至20μL.qPCR反应程序：95℃预变性30 s，95℃变性5 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，40个循环.采用2-ΔΔCt法计算出DlDFR、DlLAR、DlANR基因的相对表达量.