《表2 抗体可变区引物：白鲢肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶单域抗体文本库构建及淘选》

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《白鲢肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶单域抗体文本库构建及淘选》

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鲨鱼免疫应答成功后，提取外周血液淋巴细胞用TRIzol法提取RNA，逆转录成第一链c DNA，根据引物（表2）扩增鲨鱼新抗原受体（new or nurse shark antigen receptor，NAR）可变区片段，回收纯化目的片段；将VNAR片段与载体p HEN2用Nco I和Not I双酶切，经T4连接酶构建重组噬菌粒，利用电击法将重组噬菌粒p HEN2-VNAR电转入新鲜制备的感受态大肠杆菌TG1，梯度稀释后涂步到2xYT/A100/G2固体培养基，计算库容量，随机挑取30个单菌落进行菌落PCR鉴定。刮取培养基上菌落，悬浮于有质量分数15%甘油的2xYT液体培养基中，分装-80℃保存。